domingo, 15 de julio de 2012

Uso de Transgénicos



Se ha desarrollado un modelo transgénico anti-a3 (IV) NC1 del colágeno Ig,. El modelo de Ig transgénico es útil para estudiar la tolerancia de células B. Implicando la identificación de un anticuerpo anti-alpha3 (IV) NC1 anticuerpo monoclonal (AcMo) que se une a un epítopo patógeno, la clonación del anticuerpo genes H y L de cadena y las secuencias reguladoras, la generación de Ig H + L ratones Tg, y la evaluación del fenotipo resultante células B. El transgénico de células B del receptor en este modelo se dirige a un epítopo reconocido por colágeno patógeno de IgG en los sueros de los pacientes GPS. El análisis del destino de las células B Tg indica que las células reactivas del colágeno son tolerantes y no ignorantes inmunológicamente. La eliminación de anticuerpos endógenos (no-Tg) y las células T mediante la creación de ratones Tg con deficiencia de activador de recombinación genética (GAR) conduce al agotamiento casi completo de Ig y células B que es evidente en la médula ósea, así como el bazo. En conjunto, estos resultados indican que las células anti-alpha3 (IV) NC1 se regulan in vivo, sugiriendo que los epítopos reactivos están expuestos y que ambos (alpha3 (IV) NC1 colágeno o una reacción cruzada auto-antígeno) es tolerogénico. La tolerancia central en la deficiencia de Rag-Ig ratones Tg indica además que tolerógeno se encuentra en la médula ósea.

B cell surface transgene expression of spleen (A, B) and bone marrow (C, D) from Rag enzyme sufficient (A, C) and Rag-deficient (B, D) B6 mice. Shown are representative dot plots of log fluorescence data for stained unstimulated cells gated on lymphocytes on the basis of forward and side scatter. Mouse genotypes include mice lacking the Tg (Non-Tg), mice hemizygous for both H and L chain Tg (Tg), mice sufficient in Rag enzyme (Rag+), and mice homozygous for Rag enzyme deficiency (Rag-). Cells were stained with PE or PerCP conjugated anti-B220 and FITC or PE labeled anti-IgM, anti-IgMa, or anti-IgMb. The Tg H chain is IgMa-allotype, whereas B6 mice endogenously express only IgMb.



Referencias

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